염색시약 만들기(메틸렌블루, 아세트 올세인, 에오신, 야누스그린B)

생명과학 실험에서 사용하는 염색시약을 제조하는 방법을 안내합니다.

 

영상으로 보고 싶다면 아래 유튜브로 접속해주세요.
https://youtu.be/VL-EkZv3Mxk

실험 방법

가. 메틸렌블루 용액 만들기

① 95% 에탄올 15ml에 0.15g의 메틸렌블루를 녹인 후 50ml의 증류수를 첨가하여 사용한다.

 

0.15g의 메틸렌블루 가루를 잽니다.

 

비커로 옮겨주세요.

 

눈금실린더를 이용해 95% 에탄올 15ml를 잽니다.

이런 경우 50ml짜리 눈금실린더 사용하는 것이 더 좋습니다.

 

95% 에탄올 15ml에 0.15g의 메틸렌블루를 녹입니다.

 

50ml의 증류수를 넣어주세요.

 

섞어 준후 시약병에 넣고 명찰을 붙여주면 완성입니다.

메틸렌 블루는 핵을 파랗게 염색시키는 시약입니다.

나. 아세트올세인 용액 만들기

① 45% 아세트산 50ml에 올세인 0.5g을 놓고 핫플레이트로 가열한다.

 

올세인가루 0.5g을 잽니다.

 

아세트산 45%를 맞추기 위해 증류수와 섞어 만들었어요.
화학실에 있는 후드에서 작업해주세요. 환기 필수!

 

올세인 가루를 아세트산 50ml에 녹이고 끓여줍니다.
화학실에 있는 후드에서 작업해주세요. 환기 필수!

 

 

② 용액이 끓기 시작하면 냉각시킨 후 깔때기에 거름종이를 접어놓고 여과 시킨다.

용액이 끓기 시작하면 냉각시킨 후
깔때기에 거름종이를 접어놓고 여과 시켜주세요.

 

 

③ 사용할 때는 한번 더 여과하여 시약병에 넣어 사용해주세요.

 

아세트 올세인은 핵을 보라색으로 염색시킵니다.

직접 제작해서 사용하면 염색체 관찰할 때 정말 좋아요.

 

다. 에오신(eosin) 용액 만들기

① 에오신(eosin) 1g과 증류수 혹은 70% 에탄올을 100ml를 섞은 후 사용한다.

 

에오신 가루를 삼각플라스크에 옮겨주세요.

70% 에탄올을 100ml를 준비해주세요.

99% 에탄올과 증류수를 7:3으로 섞어 만들었어요.

 

삼각플라스크에서 섞어주세요.

시약병에 넣어 사용합니다

 

에오신은 세포질을 주황색으로 염색시켜요.

핵도 염색이 되는 걸 볼 수 있어요.

 

*김자액 만들어 관찰하기

에오신과 메틸렌 블루가 섞인 용액이 김자액입니다.

김자액은 핵은 파랗게, 세포질은 주황색으로 염색시켜 백혈구 관찰에 주로 사용해요.

 

 

라. 야누스 그린 B 용액 만들기

①야누스 그린 B 가루0.01g과 생리식염수 100ml를 섞은 후 사용한다.

야누스 그린B는 미토콘드리아를 녹색으로 염색하는데 사용합니다.

 

 시약병에 넣어 사용합니다.

 

실험에 사용할 염색시약을 만들어보는 내용이였습니다. 제조해서 사용하면 훨씬 좋은 상을 관찰할 수 있어요.